Citometría

Separación celular: Separador celular FACSAria II (BD Biosciences). Tres láseres (405, 488 y 633 nm), quince detectores (trece fluorescencias y dos parámetros de dispersión de luz). Unidad de Deposición Celular Automatizada (ACDU) para la separación en diferentes tipos de placas de pocillos y portaobjetos; opción de celda individual. Opciones instaladas: sistema de evacuación de aerosoles (AMO) y control de temperatura para baño refrigerado. Software FACSDiva. Analizadores de citómetros de flujo: Citómetro de flujo LSRFortessa SORP (BD Biosciences). Equipado con láser azul de estado sólido (488 nm), láser rojo de He-Ne (640 nm), láser violeta (405 nm) y láser verde (532 nm), permite trabajar con 18 fluorescencias y dos parámetros de dispersión (FSC y SSC), analizando para cada uno el área, la altura y la anchura del pulso eléctrico. Procesamiento, adquisición y análisis de señales digitales con el software FACSDiva. Sistema HTS para la adquisición de muestras con placas de 96 pocillos. Separador de células FACSLyric (BD Biosciences). Equipado con láser azul de estado sólido (488 nm), láser rojo de He-Ne (633 nm) y láser violeta (405 nm), permite trabajar con diez fluorescencias y dos parámetros de dispersión (FSC y SSC). Sistema de procesamiento digital de señales con el software BD FACSSuite. Equipado con cargador de muestras automático para tubos y placas de 96 pocillos. Citómetro de flujo FACSCanto II (BD Biosciences). Equipado con láser azul de estado sólido (488 nm), láser rojo de He-Ne (633 nm) y láser violeta (405 nm), permite trabajar con ocho fluorescencias y dos parámetros de dispersión (FSC y SSC). Sistema de procesamiento digital de señales con el software FACSDiva. Equipado con cargador de muestras automático para tubos (Loader). Luminex® 200 (Luminex Corp.). El sistema Luminex® 200 es un analizador basado en los principios de la citometría de flujo. Luminex® 200 establece el estándar de multiplexación y ofrece la capacidad de realizar hasta 100 pruebas diferentes en un solo volumen de reacción y utilizar microesferas magnéticas o de poliestireno. Ofrece un excelente rendimiento de muestra con un tiempo de lectura de placa de 96 frascos de tan solo 45 minutos. Programas para análisis fuera de línea: Software FlowJo, FACSDiva y CellQuestPro instalados en una computadora iMac de 27 pulgadas con Intel i7 y 16 GB de RAM, con sistemas operativos MAC OSX y Windows (XP y 7). Citometría espectral de alta dimensión: Aurora 5-laser (Cytek Biosciences). Instalado en mayo de 2020, está configurado con cinco láseres (355, 405, 488, 561 y 640 nm), tres parámetros de dispersión y 64 canales de fluorescencia. Aurora permite obtener datos de alta dimensión con paneles diseñados (40 colores simultáneos y más). Equipado con un sistema automático de micromuestreo (AMS) para la adquisición de alto rendimiento con placas de 96 pocillos. Análisis de datos con el software SpectroFlo para diferenciar los datos espectrales brutos.

Separación celular. Los citómetros de flujo con separador (FACSAria II) permiten separar las células según parámetros definidos previamente por el operador. Para purificar diferentes poblaciones celulares, la citometría de flujo está especialmente diseñada para aplicaciones que requieren una alta pureza de la muestra. El uso simultáneo de múltiples fluorocromos permite clasificar y separar subpoblaciones celulares según la expresión de diferentes propiedades celulares. La preparación del experimento de separación celular requiere una serie de pasos previos que deben especificarse previamente con el responsable de la Plataforma de Citometría. Adquisición y análisis con los citómetros analizadores de flujo BD FACSCanto II, BD FACSLyric y BD LSR Fortessa son los citómetros analizadores que el usuario puede utilizar para realizar diferentes estudios. Estos equipos pueden ser utilizados directamente por el usuario, ya sea acreditando experiencia en el manejo de los mismos o mediante un curso previo impartido por el personal de la Plataforma de Citometría. Además, el separador celular FACSAria II puede utilizarse como citómetro analizador, especialmente cuando se necesitan más detectores de fluorescencia. Análisis sin conexión en entornos Mac/Windows con el software FACSDiva y FlowJo, compensación sin conexión y escalas toponenciales o “Logicle” y ModFit. Formación: Diseño de cursos personalizados. Anualmente se imparten en el IGTP varios cursos sobre los fundamentos y aplicaciones de la citometría de flujo. Consultoría: La plataforma de citometría ofrece a los usuarios un servicio de consultoría sobre temas relacionados con la citometría de flujo.

GINYS-IGTP-002

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